


Том 67, № 2 (2025)
Статьи
Созревание ооцитов in vitro: биологические основы и перспективы клинического использования
Аннотация
Процедура созревания ооцитов in vitro (in vitro maturation, IVM) включает аспирацию ооцитов, находящихся на стадии профазы I мейоза, в составе ооцит-кумулюсных комплексов из небольших антральных фолликулов и их последующее созревание до стадии метафазы II в лабораторных условиях. IVM является перспективным методом получения ооцитов на стадии метафазы II (MII-ооцитов) в тех случаях, когда проведение гормональной стимуляции яичников нежелательно или невозможно. В то же время по темпам созревания и способности к развитию ооциты, полученные в результате процедуры IVM, уступают ооцитам, полученным в стимулированных циклах, поэтому актуальной проблемой является совершенствование протоколов IVM. В обзоре рассмотрены возможности процедуры IVM в контексте ключевых этапов созревания ооцитов и достижения ими ядерной и цитоплазматической зрелости. Освещены преимущества и недостатки различных методик IVM и основные направления их дальнейшего совершенствования.



Карнитинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридин — адаптоген широкого спектра действия, стимулирующий аутофагию в ткани печени
Аннотация
Обоснование и цель. В условиях стресса митохондрии становятся источником избыточной генерации активных форм кислорода (АФК), которые могут служить либо в качестве сигнальных молекул, либо повреждать структуры клетки. Антиоксиданты, снижая генерацию АФК, могут быть адаптогенами к стрессовым воздействиям. Показано, что ряд антиоксидантов способен вызывать аутофагию, которая может активировать систему антиоксидант-респонсивного элемента. В связи с этим цель исследования — изучить антистрессовые свойства нового антиоксиданта карнитинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина (КП) и его способности активировать синтез белков аутофагии Beclin-1 и LC3.
Материал и методика. Исследовали спектрофлуоресцентным методом влияние острой гипобарической гипоксии и КП на интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в липидной фракции мембран митохондрий печени мышей. Белки аутофагии определяли методом вестерн-блотинга.
Результаты. Введение мышам 10–6 моль/кг КП в течение 5 сут предупреждало рост интенсивности ПОЛ в условиях острой гипобарической гипоксии. КП увеличивал продолжительность жизни и повышал выживаемость мышей в условиях различных видов гипоксии. Показана инициация препаратом белков-биомаркеров аутофагии (LС3В). При этом содержание белков Beclin-1 имело тенденцию к повышению, что характеризует начало процесса аутофагии.
Выводы. Новый антиоксидант КП, вероятно, может быть использован в качестве адаптогена к различным видам гипоксии и активатора аутофагии.



Митохондрии эндокринных клеток эпителия слизистой оболочки кишки крыс при введении мелатонина (электронно-морфометрическое исследование)
Аннотация
Исследована ультраструктура митохондрий эндокриноцитов эпителия слизистой оболочки двенадцатиперстной и ободочной кишки крыс при однократном и хроническом введении мелатонина. В цитоплазме 95—90 % эндокринных клеток при введении мелатонина выявлено уменьшение числа митохондрий, их набухание (85 % органелл), фрагментирование крист (у 70 % органелл), просветление матрикса (5 % органелл) и появление миелиноподобных структур (1—2 % органелл). Обнаруженные структурные изменения, возможно, свидетельствуют о повышении метаболической активности эндокриноцитов эпителия в ответ на экспериментальное воздействие.



Оценка влияния ксантеновых красителей на физические свойства липидных мембран методом молекулярной динамики
Аннотация
Обоснование и цель. Правильный выбор красителей, особенно нацеленных на клеточные мембраны, является первостепенной задачей для успешных научных исследований. В настоящей работе изучено влияние ксантеновых красителей (флуоресцеина, эритрозина, эозина Y и бенгальского розового) на физические свойства модельных липидных мембран.
Метод. Молекулярное моделирование.
Результаты. Выявлено, что ксантеновые красители увеличивают площадь, приходящуюся на одну липидную молекулу, эффект возрастает в ряду флуоресцеин ≈ эозин Y < эритрозин ≤ бенгальский розовый. Расчет параметра упаковки «хвостов» молекул фосфолипидов показывает, что флуоресцеин, эритрозин и эозин Y оказывают разупорядочивающее действие на мембраны, в то время как бенгальский розовый практически не влияет на этот параметр. Оценка изменения дипольного потенциала фосфолипидной мембраны в присутствии красителей показывает, что их способность снижать эту величину возрастает в ряду флуоресцеин ≤ эозин Y ≈ эритрозин < бенгальский розовый.
Вывод. Сопоставление результатов молекулярной динамики с данными электрофизиологических исследований и дифференциальной сканирующей микрокалориметрии выявило ряд расхождений, причины которых обсуждаются.



In ovo — метод выделения первичных зародышевых клеток из эмбриональной крови генофондных пород кур
Аннотация
Несмотря на ключевую роль примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) в направленном изменении генома, существуют значительные трудности с эффективностью их выделения. В настоящей работе представлен новый метод (in ovo — внутри яйца) выделения из эмбриональной крови генофондных пород кур, который имеет важное значение для сохранения генетических ресурсов птиц и создания новых инновационных инструментов в области биотехнологии. ПЗК выделяли из крови эмбрионов кур различных пород (5 пород, 192 четырехсуточных эмбриона) и далее оценивали способность их к культивированию в течение 20 сут. Для анализа эффективности метода были проведены эксперименты по отбору проб крови у 192-х эмбрионов исследуемых пород кур и дальнейшее культивирование ПЗК. Результаты оценивали с применением однофакторного дисперсионного анализа ANOVA. Выявлено, что эффективность отбора образцов зависит от массы яйца и породы. Самый высокий показатель эффективности выделения ПЗК демонстрировали яйца китайской шелковой породы (89.5 %). Анализ данных культивирования ПЗК показал увеличение пролиферации клеток к 20-м сут. Наибольшую выживаемость наблюдали у китайской шелковой породы (69.1±2.56 %), у кур пород царскосельская (68.78±3.39 %) и род-айленд (67.9±2.2 %). Результаты показали пригодность метода in ovo для выделения ПЗК из 4-суточных эмбрионов кур и его большую эффективность, в отличие от методов, описанных в литературе.


